多克隆抗体和单克隆抗体的关键差异及各自的优缺点。

小结

多克隆抗体

特点：

• 识别任一抗原上的多个表位。所得血清为异质性抗体混合物，其亲和力各有不同。

• 多克隆抗体主要由 IgG 亚类组成。

• 通常使用多肽免疫原制备以独有表位为靶标的多克隆抗体，尤其是针对高同源性的蛋白家族。
  
  

抗体制备：

• 制备成本低廉且制备速度较快。

• 制备过程比单克隆抗体简单。

优点：

多克隆抗体可识别任一抗原上的多个表位，因此具有以下优点:

• 高亲和性：由于靶蛋白上的多个表位能够结合不止一个抗体分子，多克隆抗体可放大低表达水平靶蛋白的信号。但是，这会影响定量实验（如流式细胞术实验）结果的准确性。

• 可识别多个表位，有利于免疫沉淀 (IP) 和染色质免疫沉淀 (ChIP) 实验获得更好的结果。

• 与单克隆抗体相比，对微小抗原变化（例如多态性、糖基化异质性或者轻微变性）的包容性更强。

• 可识别与免疫原蛋白质具有高度同源性的蛋白质，还可用于筛查非免疫原物种的靶蛋白。

• 通常是检测变性蛋白质的首选。

• 多表位通常可提升检测的稳定性。

缺点：

• 易产生批次间差异。

• 产生大量非特异性抗体，可能会在某些应用中产生背景信号。

• 由于具有多个表位，检测免疫原序列的交叉反应性非常重要。

• 不适用于探测抗原的特定结构域，因为抗血清通常会识别多个结构域。

单克隆抗体

特点：

• 不易产生批次间差异。

• 仅由一种抗体亚型组成（例如 IgG1、IgG2、IgG3）。如需使用二抗进行检测，应针对正确的亚类选择抗体。
  
  

抗体制备：

• 技术要求较高。

• 应用技术之前需接受专门培训。

• 需要花费较长时间制备杂交瘤细胞。

优点：

制得的杂交瘤细胞为持续且可再生产的单克隆抗体来源，而且所有批次均相同，有助于提升实验过程和实验结果的一致性和标准化水平。

单克隆抗体只检测每个抗原上的一个表位，因此具有以下优点:

• 切片和细胞染色产生的背景信号更少。特异性地检测一个靶表位，不易与其它蛋白质发生交叉反应。

• 由于具有高特异性，单克隆抗体非常适于用作实验中的一抗，其产生的背景染色信号通常显著低于多克隆抗体。

• 相较于多克隆抗体，单克隆抗体的同质性非常高。在相同的实验条件下，单克隆抗体实验之间的结果重现性非常高。

• 得益于其高特异性，单克隆抗体能够在相关分子的混合物中（例如在亲和纯化过程中）极为高效地结合抗原。

缺点：

• 特异性过高，以致于无法进行跨物种的检测。

• 与多克隆抗体相比，更易受化学处理造成的抗原表位丢失的影响。这可通过合并靶抗原相同的两种或多种单克隆抗体进行补偿（例如使用抗体组合试剂盒）。